奥林巴斯显微镜:奥林巴斯荧光显微镜原理
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奥林巴斯荧光显微镜是用来观察研究样品荧光现象的奥林巴斯光学显微镜,目前主要用落射照明技术,由光源、滤片系统、光路系统等组成。
荧光光源——般采用超高压汞灯(50一200W)或者高功率LED光源,它可发出各种波长的光,但每种荧光物质都有一个产生强荧光的激发光波长,所以需加用激发滤片(一般有紫外、紫色、蓝色和绿色激发滤片),仅使一定波长的激发光透过照射到标本上,而将其他光都吸收掉。每种物质被激发光照射后,在极短时间内发射出较照射波长更长的可见荧光。荧光具有专一性,一般都比激发光弱,为能观察到专一的荧光,在物镜后面需加阻断(或压制)滤光片。它的作用有二:
一是吸收和阻挡激发光进入目镜、以免于扰荧光和损伤眼睛,
二是选择并让特异的荧光透过,表现出专一的荧光色彩。
两种滤光片必须选择配合使用。
滤片系统是荧光显微镜的重要组成部分,由激发滤片、二向色性滤光片、发射滤片组成。激发滤片位于光源和标本之间,允许特定波长范围的光通过,作为样品的激发光。发射滤片位于奥林巴斯荧光显微镜物镜和奥林巴斯荧光显微镜目镜之间,允许标本发射的荧光通过,以获得清晰的图像。二向色性滤光片在激发滤片和发射滤片之间,是一种入射角为45o的干涉滤光片,它可以反射一定波长的光同时透过另外波长范围的光线。
奥林巴斯荧光显微镜广泛应用在生命科学领域,可对组织和细胞的结构、形态、蛋白质表达、亚细胞结构等进行定位、定性观察及分析。
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