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荧光滤色块是荧光显微镜的核心部件,内装激发、发射和半透半反滤光片(又称二向色镜)。荧光光源透过滤色块时,某个激发波段的光线被过滤,经过半透半反滤色片的反射,经物镜汇聚后,进入样品实现激发,发射出特定波段的荧光透过发射滤光片,被检测器捕捉到,形成荧光图像,完成荧光检测。
简单来说由3个滤色片组成:
(1)激发滤片:从汞灯发出的光源选择出特定波长的光,譬如340-380带通,就是指340-380的波长的光都可以透过。
(2)分光二向色镜:作用是令短波长的光(激发光)反射,长波长的光(荧光)透射。譬如说 400nm分光,指低于400nm的光反射经物镜照到样品,然后激发出来的荧光透射过二向色镜到达发射波滤片。
(3)发射滤片:用来选择染料的特定发射光。譬如 415长通,就是指大于415nm的光透射,低于415nm的光全部阻断。作用主要是挡住其他染料的荧光或者反射光。
其实,显微镜厂家都不生产滤片,只是购买滤色片厂家的成品进行加工。
著名的三大滤色片生产商:
(1)Chroma
Chroma于1991年5月成立,它专业生产紫外、可见、近红外波段的滤色片,包括单一带宽、多个带宽、长通、短通滤色片,也生产分光镜、二向分色镜和激光滤色片等。他们的特点是能进行精密的光谱控制,制造过程是在真空下将两到三种材质的薄层精确地沉积在玻璃或其他透明物质上。 目前, Chroma是四大厂家中三个的主要供应商,是另一个的二级供应商。可见Chroma在荧光显微镜滤色片行业的地位!
(2)Omega
Omega成立于1969年,一直专注于为荧光显微镜提供滤色片,它生产的干涉滤光片在世界范围内是一流的产品。被广泛应用于波长从紫外到红外包罗万象的领域;从用于光谱测定、临床诊断的频带滤光片,和用于荧光发射、电视和摄影的颜色分离的长/短通道滤光片,到应用于荧光显微镜上光谱特定区域上佳反射和另一区域佳透射的二向色分光镜、激光滤光片、解析滤光片等等,产品众多,应用广泛,在工农业、生物科学、科研教育领域发挥着无与论比的作用。 和Chroma相比,Omega的价位要低些,因此市场占有量更高些。
(3)Semrock
Semrock有三种主要产品:为荧光设备制作的光学滤色片、拉曼设备滤片和激光分析滤片。所有的Semrock光学滤片都是由硬离子束喷镀涂层的,这样的产品非常稳定。顶尖产品BrightLine荧光滤片能够大大改善荧光显微镜的表现;高鉴别性RazorEdgea滤片专为拉曼系统设计;独特的超宽频带MaxMirror是激光分色镜。
和以上两个公司相比,Semrock公司的产品特点就是所有的滤色片都是硬镀膜的,同时价格也不菲。
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